Diabetologia：激活但机能受损的记忆Tregs在1型糖尿病患者进展缓慢的过程中逐渐扩展

从第一次再次出现呼吸道自身HIV到再次出现1HG肝炎临床呕吐的重大突破百余人在成人末期就有很好的阐述，多个呼吸道自身HIV感染性的成人里有70%在肝脏匹配后10短期内里风肝炎，而随访15年的成人这一比百余人减小到84%。即便如此，占有临床1HG肝炎一半以上的HG1HG肝炎的确诊机制还并未得不到必要的研究工作。

越来越多的人开始可用分期该系统来度量1HG肝炎的重大突破：有机体在再次出现多种呼吸道自身HIV时转入第1下一阶段，再次出现血糖异常时转入第2下一阶段，再次出现呕吐时转入第3下一阶段。一些多发呼吸道自身HIV感染性的有机体，在1期和2期，重大突破较极快，并其发展为确诊的1HG肝炎。我们在此之后阐述了一两组在首次验证到多种呼吸道自身HIV抽取后有数10年无肝炎的极极快重大突破者，这两组病患数目寡，但特质更加确切。随后，我们发现呼吸道自身蛋白质特异性CD8+T蛋白质反应以在重大突破很极快的病患里基本不假定，但在近期确诊和长期假定的肝炎病患里很容易验证到。这有可能指出，与重大突破病患比起，这些病患自身抗体的可抑制进一步提高。

早期研究工作指出，尽管可抑制性T蛋白质(Treg)为数短时间，但肝炎病患假定一些动态不足之处，其里包括对IL-2的反应以潜能增加。此外，肝炎病患里的现象CD4+T蛋白质有可能对可抑制极具抵抗性，体现为现象T蛋白质的可抑制逼近，共存产生的Treg和体外产生的其会Treg，以及蛋白质经历的CD4+T蛋白质里IL-2反应以逼近。本研究工作的最终目标是阐述了CD4+可抑制性T蛋白质(Treg)在领头极很极快重大突破者里的特质，他们的平均年龄为43岁(31-72岁)，随访时间为18-32年。

方法有：BOX研究工作是一项以人群辅以的里轴研究工作，在21岁表列住院的病患直系亲属里检查1HG肝炎的可怕因素。我们在此之后阐述了长期很极快重大突破者的特质，他们始终保持多重呼吸道自身HIV感染性高达10年，但并未再次出现肝炎的临床呕吐，极快性或非开展性神经性。随后，10名继续始终保持无肝炎并乐意提供大量血液抽取的很极快重大突破者纳入T和B蛋白质动态分析。在目前的研究工作里，8名极快重大突破者(SP两组)，里位年龄43岁(31-72岁)，18 - 32岁错综复杂的呼吸道自身HIV感染性。所有的自发性都处于1HG肝炎重大突破的1期，尽管一些人随后夺去了呼吸道自身HIV对某些蛋白质的感染性反应以，然而，一名病患已经处于2期有数6年，但并未再次出现临床呕吐，一名病患被诊断为肝炎，该病人72岁，在通过辨别检验抽取时，其HbA1c升高到53 mmol/mol(7%)，在数据分析里对该NADP开展了单独评量。分立外周血单个核蛋白质(PBMCs)，换用多参数流式蛋白质妖术和T蛋白质可抑制试验评量NADP里Treg的kHz、表HG和动态。可用FlowSOM和CITRUS(聚类确认、表征和紧接著)开展无委派聚类分析，评量Treg表HG。

结果：与身心健康NADP比起，来自极快重大突破体的遗忘CD4+T蛋白质的委派聚类看出，其会的遗忘CD4+ TregkHz减小，与糖皮质激素其会的TNFR相关蛋白(GITR)暗示减小有关。一名HbA1c升高的病患与重大突破很极快者和匹配的对照两组比起，Treg谱有所各有不同。动态已经有，与身心健康NADP比起，来自很极快重大突破体的Treg介导的CD4+现象T蛋白质可抑制显著受损。体现为对现象CD4+T蛋白质CD25和CD134暗示的可抑制减小。

由此可知1 深入的表HG分析看出，CD4+Treg亚HG在极快重大突破队列里减小。由FlowSOM生成的Treg二楼，群聚在来自所有NADP的来时CD4+CD45RA -蛋白质上。根据标有物暗示确认出10个元簇:遗忘T蛋白质_1;遗忘T cell_2;遗忘T cell_3;遗忘T cell_4;CD49b遗忘T蛋白质;HLA-DR + GITR +遗忘T蛋白质;寄存器Treg_1;寄存器Treg_2;寄存器Treg_3;和寄存器Treg_4。(a)可用9个各有不同Treg标有生成的10个元簇的MST。每个路由表代表一个空降兵(100个空降兵)，极大的元空降兵(10个元空降兵)在路由表两组周围上色。每个路由表里的饼由此可知问到单个标有的暗示级别。(b)每个元聚类的热由此可知，以看出整体标有暗示。(c, d)为HD两组(c)和SP两组(d)生成由此可知，以及FlowSOM标有的每个元簇的覆盖层。(e-l)一般来说总质量为每个metacluster木箱终点站由此可知(总质量> 0.05%)确定为HD和SP两组:寄存器Treg_2 (e),寄存器Treg_3 (f),寄存器Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +遗忘T蛋白质(h)、遗忘T cell_1(i),遗忘T cell_2 (j),遗忘T cell_3 (k) n d CD49b遗忘T蛋白质(l)。绿色带子代表慈善机构SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon匹配符号秩检验。此键适用于由此可知形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

由此可知2 可用CITRUS的预测模HG证实，TregkHz的减小是重大突破很极快的图标。分级介导(a - f)和果树分析(g-k)来得SP自发性和匹配的HD自发性在CD4+CD45RA−T蛋白质上的相似之处。(a)亲本CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l小团体的指标性由此可知。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3掺入，然后通过HLA-DR和GITR暗示开展分立，演示FlowSOM小团体。(b) HD(黑点)和SP(黑斑)两组以及NADPSP 606(绿色)里CD25+ cd127的kHz摘要由此可知。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+介导可数的木箱终点站由此可知;(c) HLA-DRloGITR−(寄存器Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(寄存器Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(寄存器Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+寄存器T cell)。(g - i)柑桔簇螺旋由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3暗示准确度纹理，箭头显眼的簇被标有为SP和HD队列错综复杂的各有不同。(j)木箱终点站由此可知看出了在SP(黑斑)和HD(灰点)两组里，CITRUS遗忘Treg_3和Treg_4的一般来说总质量(比百余人)。(k)直方由此可知看出每个簇的表HG(暗红色)和Treg标有一般来说暗示与文化背景暗示(黄色);上列，寄存器Treg_3;示意图一行，寄存器Treg_4。文化背景与所有其他簇里标有的暗示有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon匹配符号秩检验

由此可知3 与身心健康献血者比起，重大突破很极快者遗忘treg的GITR减小。每个遗忘CD4+T蛋白质元簇(遗忘T蛋白质_1;遗忘T cell_2;遗忘T cell_3;CD49b +遗忘T蛋白质;HLA-DR + GITR +遗忘T蛋白质;寄存器Treg_2;寄存器Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)验证每个暗示标有的改变。(a,b)来自HD (a)和S (b)队列的暗示热由此可知(sp606不包括在内)。(c,d)遗忘Treg_4元簇里所有HD(灰色)、所有SP(黄色)和SP 606(绿色)的FlowSOM GITR暗示串联，看出直方由此可知(c)和摘要由此可知(d)。Wilcoxon匹配符号秩和检验，p< 0.07(绿色)所有NADP包括，p< 0.05(黄色)NADPSP 606和匹配的HD不包括在测试里。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs里GITR暗示，从分级介导，从所有HD(灰色)、所有SP(黄色)和SP 606(绿色)串联，看出直方由此可知(e)和摘要由此可知(f) *p< 0.05, Wilcoxon匹配符号秩检验

由此可知4 来自很极快重大突破的CD4+ treg蛋白质控制现象CD4+T蛋白质的潜能增加。SP两组用黄色的终点站和带子问到，HD两组用灰色的终点站和带子问到，绿色的终点站/带子问到NADPsp606。可用CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T蛋白质开展分选。CD4+CD25−(这样的话者)被标有为CFSE, Treg按辨别的比百余人反应以物。用抗CD3 /28微珠再造蛋白质，培养3天后开展流式蛋白质妖术验证。(a-d)与CD4+这样的话者一般来说应以的treg培养(自体)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD这样的话者培养。(a,b,f) CFSE再生(a,e)和CFSE可抑制比百余人(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的可抑制比百余人。可用感染性对照(其会的鼓动以蛋白质不含treg)计算可抑制比百余人。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差分析。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重来得测试

由此可知5 现象CD4+T蛋白质对很极快重大突破的T蛋白质再造的可抑制更尖锐。SP两组用黄色的终点站和带子问到，HD两组用灰色的终点站和带子问到，绿色的终点站/带子问到NADPsp606。可用CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T蛋白质开展分选。CD4+CD25−(这样的话者)被cfsel标有，treg按辨别的比百余人反应以物。用抗CD3 /28微珠再造蛋白质，培养3天后开展流式蛋白质妖术(CD25反染)和蛋白质因子分析。HD Treg与HD、SP或sp606这样的话者共同完成培养。(a,b) CFSE再生(a)和CFSE可抑制三份(b)。(c,d) CD25可抑制三份(c)和CD134可抑制三份(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在共培养里的暗示。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差分析。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重来得测试

推论：我们断定的推论是，来自很极快重大突破子的再造遗忘CD4+Treg在GITR暗示里得不到了扩展和珍贵，强调了进一步研究工作Treg在1HG肝炎风险有机体里的表征的全面性。

原文记事：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28